WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 10 |

Нейропротекторные свойства и механизм действия новых производных аналогов гамма-аминомасляной кислоты

-- [ Страница 3 ] --

На всех этапах исследования контрольные группы животных получали физиологический раствор в эквивалентном объеме. В качестве препаратов позитивного контроля в работе использовались в эффективных терапевтических дозах: фенибут и фенотропил – 25 мг/кг, пирацетам (PIRACETAM; р-р д/инъ 20% 5мл №10; УфаВита (г.Уфа), Россия) – 400 мг/кг.

Для нейрофармакологического анализа возможных механизмов действия соединения РГПУ-147 использовались: неконкурентный антагонист пресинаптических ГАМК-А рецепторов - пикротоксин 5 мг/кг (Sigma, США), блокатор хлорного канала ГАМК-А рецепторного комплекса – коразол 90 мг/кг (Aldrich, Германия), селективный антагонист ГАМК-А рецепторов – бикукуллин 2,7 мг/кг (Fluka, Швейцария), агонист центральных постсинаптических дофаминовых рецепторов – апоморфин 1 мг/кг (Sigma, США), антагонист центральных D2-рецепторов с центральным альфа-адреноблокирующим действием, ингибитор реаптейка и депонирования адреналина – галоперидол 1 мг/кг (Lake Chemikals PVT. LTD, India), агонист центральных пресинаптических -адренорецепторов – клофелин 0,1 мг/кг (Минмедпром объединение им. 60-летия СССР, Россия), М-холиномиметик – ареколин 25 мг/кг (Aldrich, Германия), агонист центральных и периферических Н-холинорецепторов – никотин 0,2 мг/кг (Sigma, Германия), предшественник серотонина - 5-окситриптофан 300 мг/кг (Sigma, Германия).

Для функциональной оценки психоневрологического статуса животных в условиях моделирования нейропатологии применялись психофармакологические тесты в стандартной модификации: тест «открытое поле» (ОП) (Хаунина Р.А., Лапин И.П. 1976 г., Воронина Т.А. 1982; Гельман В.Я., Кременевская С.И., 1990); тест «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) (Pellow S. et al., 1985); тест «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ) (Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон Д.П., 1991; Воронина Т.А., Островская Р.У., 2000), «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ) (Бондаренко Н.А., 1992.).

Для анализа влияния исследуемых веществ на морфофункциональное состояние структур головного мозга животных, подвергшихся моделированию нейропатологии, забирали образцы головного мозга, которые фиксировали нейтральным 10% формалином в течение 24 часов, с дальнейшим обезвоживанием в батарее спиртов и изготовлением парафиновых блоков (Меркулов Г.А., 1969; Саркисов Д.С., Перов Ю.Л., 1996), затем окрашивали тионином по методу Ниссля (Лилли Р., 1969; Меркулов Г.А., 1969). Микрофотосъемку гистологических препаратов производили на микроскопе MICROS AUSTRIA (Австрия) цифровой фотокамерой «Olympus» (Япония) на увеличении 100, 400. На срезах, окрашенных по Нисслю, определяли степень поражения нейронов (Чубинидзе А. И., 1972), выполнено морфометрическое исследование.

Таблица 2.

Дизайн исследования: Изучение нейропротекторных свойств и механизма действия новых производных аналогов ГАМК.

Модели нейропатологии Тесты и показатели, использованные для оценки нейропротекторного действия веществ Вещества и препараты сравнения
Скрининг веществ с нейропротекторной активностью среди 43 структурных аналогов ГАМК
1 максимальный электрошок (МЭШ) (Воронина Т.А., Неробкова Т.Н., 2000, 2005). продолжительность комы, продолжительность периода до восстановления двигательной активности животных, общая продолжительность судорог, длительность тонической и клонической фаз судорожного приступа 43 структурных аналога ГАМК – соли и композиции фенибута, карфедона, толибута, баклофена, мефебута и фепирона с органическими кислотами (лимонной, янтарной, яблочной, щавелевой, никотиновой, глутаминовой и глицином)
2 электроконвульсивный шок (Воронина Т.А., Неробкова Т.Н., 2000, 2005). Функциональная оценка психоневрологического статуса и когнетивно-мнестической функции мозга животных, подвергшихся генерализованным судорогам, проводилась с использованием тестов ОП, УРПИ и ТЭИ.
Изучение влияния наиболее активного вещества на морфофункциональное состояние структур головного мозга животных, подвергшихся моделированию нейропатологии
3 электроконвульсивный шок (Воронина Т.А., Неробкова Т.Н., 2000, 2005). Морфометрическое исследование Соединение РГПУ-147, пирацетам, фенибут
Изучение зависимости доза-нейропротекторне действие для наиболее активного нового производного ГАМК.
4 Модель глобальной ишемии, вызываемой гравитационной перегрузкой в кранио-каудальном векторе (ГИ), которая воспроизводилась с помощью специально разработанной центрифуги




2 (Гаевый М.Д., 2000).
Влияние вещества на выраженность неврологического дефицита оценивали по шкале McGrow в модификации И.В. Ганнушкиной (1996). Оценку влияния вещества на психоневрологический статус и когнетивно-мнестическую функцию мозга ишемизированных животных проводили в тестах: «вращающийся стержень» (Караев А. Л, Козлова Г.С. и др., 2004г.), УРПИ, ТЭИ, ОП. Соединение РГПУ-147 в трех дозах: 1/100, 1/30 и 1/10 от LD50 мг/кг
5 модель острого эмоционально-болевого стресса, вызываемого путем подвешивания животных за дорсальную шейную кожную складку длительностью 24 часа (Островский О.В., Дудченко Г.П., 1985) Нейропротекторное действие соединений оценивалось по влиянию на психоневрологический статус животных и когнетивно-мнестическую функцию мозга в тестах ОП, ПКЛ, УРПИ и ТЭИ
6 методика принудительной субхронической алкоголизации животных (Воронков А.В., 2003). Через 7 дней после принудительной алкоголизации изучалось влияние вещества на психоневрологический статус и когнетивно-мнестическую функцию мозга животных в тестах: ОП, ПКЛ, УРПИ и ТЭИ.
Изучение нейропротекторного действия соединения РГПУ-147 в условиях ишемии головного мозга
7 Модель неполной переднемозговой ишемии головного мозга, вызываемой необратимой одномоментной билатеральной окклюзией общих сонных артерий у крыс (ОСА) ( Мирзоян Р.С, 2000). Регистрация количества выживших животных через 3, 12, 24, 48 и 72 часа после операции. Соединение РГПУ-147, пирацетам, фенибут и фенотропил
8 Модель глобальной ишемии, вызываемой гравитационной перегрузкой в кранио-каудальном векторе. Шкала McGrow в модификации И.В. Ганнушкиной (1996), тесты: «вращающийся стержень», УРПИ, ТЭИ, ОП. Морфометрическое исследование
Изучение нейропротекторного действия соединения РГПУ-147 в условиях стрессорного поражения ЦНС
9 Модель острого эмоционально-болевого стресса, вызываемого путем подвешивания животных за дорсальную шейную кожную складку длительностью 24 часа. Нейропротекторное действие соединений в условиях стресса оценивалось по влиянию на психоневрологический статус и когнетивно-мнестическую функцию животных в тестах ОП, ПКЛ, УРПИ и ТЭИ, а также по выраженности «стрессорной триады» - гипертрофии надпочечников, инволюции тимуса и селезенки (определялась относительная масса органов в мг/100г веса животного), степени изъязвления слизистой желудка (по шкале Перцова С.С., 1995). Морфометрическое исследование. Соединение РГПУ-147, пирацетам, фенибут и фенотропил
10 Модель хронического стресса, вызванного семикратной 24-х часовой депривацией парадоксальной фазы сна. (Воронина Т.А. и др., 1990; Jouvet et al. 1964).
Изучение нейропротекторного действия соединения РГПУ-147 в условиях алкогольно-токсического поражения ЦНСа
11 Модель принудительной субхронической алкоголизации животных. (Воронков А.В., 2003) Нейропротекторное действие соединений в условиях алкогольной интоксикации оценивалось по влиянию на психоневрологический статус и когнетивную функцию животных в тестах ОП, ПКЛ, УРПИ и ТЭИ. Морфометрическое исследование Соединение РГПУ-147, пирацетам, фенибут и фенотропил
12 Модель добровольной хронической алкоголизации (Майский А.И., Салимов Р.М., 2000).
Изучение возможных механизмов нейропротекторного действия соединения РГПУ-147:
  1. Изучение влияния вещества на мозговой кровоток и микроциркуляцию, реологию крови,
изучение антиагрегантного и антигипоксического действия
  1. Изучение влияния вещества на нейрохимический статус животных:взаимодействие с агонистами и антагонистами рецепторов основных нейромедиаторов ЦНС in vivo, влияние на обмен моноаминов и нейроактивных аминокислот в структурах мозга, влияние на межполушарное взаимодействие.
  1. Изучение влияния вещества на метаболизм головного мозга: влияние на показатели клеточного метаболизма, на процессы ПОЛ, на активность антиоксидантной системы мозга, на статус окислительного фосфорилирования в митохондриях головного мозга при экспериментальной патологии мозга.


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 10 |
 




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.