WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |

Гепатопротекторные свойства флавоноидов (фармакодинамика и перспективы клинического изучения)

-- [ Страница 5 ] --

Рисунок 2 – Влияние биофлавоноидов, СЭ и карсила на систему ПОЛ – АОС при остром алкогольном поражении у крыс

уменьшение накопления МДА при Fe2+аскорбатиндуцированном ПОЛ ПФП, за исключением животных, получавших гесперидин (накопление оставалось выше нормы на 62%).

В отношении восстановления ферментативной АОЗ можно отметить значительное сходство в действии диосмина, флавицина и СЭ. При применении флавицина и СЭ при алкогольной интоксикации на уровне нормальных значений находились практически все показатели АОС: СОД, каталаза, ГП общ., Г-S-Т, GSH, общая НАДФН+-редуктазная активность (малат+глюкозо-6-фосфат+изоцитрат) с выраженной степенью подъема Г-6-ФДГ. Лишь активность ИЦДГ при применение СЭ не достигала интактных значений, но при этом активность Г-S-Т и ГР были достоверно выше нормы и контроля соответственно. Действие диосмина характеризовалось несколько меньшей эффективностью: из перечисленных показателей не полностью восстановились общая НАДФ+-редуктазная активность ( в основном из-за ИЦДГ) и активность ГП. То же самое можно отметить и в действии кверцетина, но, кроме этого, не полностью восстанавливалась активность каталазы и оставались на низком уровне активности Г-S-Т, ГР и ИЦДГ. Под влиянием гесперидина и карсила наблюдалась полная нормализация СОД и каталазы, практически в равной мере повышалось содержание GSH. При действии гесперидина отмечалось некоторое увеличение активности ГП, но при введении карсила активность данного фермента не изменилась по сравнению с животными, получавшими только этанол. В то же время, гесперидин не повлиял на активность Г-S-Т, а карсил нормализовал ее. В отношении НАДФ+-редуктазных активностей при применении гесперидина отмечалось увеличение до нормы МДГ при неизмененной активности ИЦДГ. В то же время карсил усиливал активность ИЦДГ, не влияя на МДГ и Г-6ФДГ. В силу этого и общая НАДФ+-редуктазная активность при их введении восстанавливалась не в полной мере.

Коэффициент окислительного стресса в результате применения флавоноидов, СЭ и карсила значительно уменьшился по сравнению с животными, получавшими только алкоголь (таблица 4). При введении флавицина и СЭ он был даже ниже 1. Наиболее высокие показатели коэффициента окислительного стресса, как и в опытах с поражением печени СС14, имели животные, получавшие гесперидин (3,26) и карсил (3,2), для которых установлена и меньшая эффективность гепатозащитного действия при алкогольном поражении печени.

Таблица 4 – Значения коэффициента окислительного стресса и процента гепатопротекции у животных с алкогольной интоксикацией и при введении биофлавоноидов, СЭ и карсила

Группы животных Прооксиданты (ТБК- акт. продукты сыв. x ТБК- акт. продукты печ. x ДК печ.x ПОЛ ПФП), в отн. ед. к норме Антиоксиданты (СОД x каталаза x ГП x Г-S-Т печ.), в отн. ед. к норме К, про-/антиоксид. % гепато-протекции
Интактные 1 1 1
Алкогольная интоксикация 5,6 0,0896 62,5
Введение гесперидина, 100 мг/кг 1,18 0,36 3,26 38
Введение диосмина, 100 мг/кг 1,34 0,60 2,23 78
Введение флавицина, 100 мг/кг 0,79 1,13 0,70 96
Введение кверцетина, 100 мг/кг 0,58 0,22 2,63 70
Введение СЭ, 100 мг/кг 0,91 1,44 0,63 97
Введение карсила, 100 мг/кг 1,28 0,40 3,20 69




Таким образом, вывод о важности поддержания про-антиоксидантного равновесия и значимости усиления собственных механизмов АОЗ при действии повреждающих факторов, нашел свое подтверждение и в опытах с алкогольным поражением печени. Корреляция между коэффициентом окислительного стресса и процентом гепатопротекции составила -0,81±0,29, Р<0,05, доказывая наличие достаточно существенной связи между эффективностью гепатозащитного действия и степенью восстановления про-антиоксидантного равновесия.

Интенсивность анаэробного пути окисления углеводов при алкогольном поражении печени на фоне применения флавоноидов, СЭ и карсила была значительно снижена, а также наблюдались восстановительные процессы в митохондриях печени и повышалось содержание АТФ. Более выраженное восстановление показателей энергетического обмена наблюдалось у животных под влиянием флавицина и СЭ, применяемых на фоне 7-дневной алкоголизации: соотношение лактат/пируват снизилось на 88% и 91%, содержание АТФ увеличилось на 127% и 106%, активности СДГ – на 135% и 137% и ЦТО- на 63% и 55% соответственно по отношению к контролю, что достоверно не отличалось от соответствующих значений у интактных животных.

В условиях алкогольной интоксикации было выявлено индуцирующее влияние на цитохром-Р450-зависимые реакции: гесперидина и карсила – на N-деметилазную (+22% и +97%) и n-гидроксилазную активности (+289% и +420%); кверцетина - на N-деметилазную активность (+131%); СЭ – на n-гидроксилазную активность (+519%). При применении флавицина и диосмина все те изменения в данных реакциях микросомального окисления, которые были вызваны введением этанола, полностью устранялись: снижалась активность N-деметилазы (-51% и -42%) и повышалась активность n-гидроксилазы (+153% и +150%) до уровня нормы (указаны проценты изменения по сравнению с контролем, получавшим только этанол).

Таким образом, наибольшая эффективность гепатозащитного действия при алкогольном поражении печени, которая превышает таковую карсила, выявлена у флавицина и СЭ. Сравнительный анализ показывает, что чем в большей степени вещества восстанавливают про-антиоксидантное равновесие и устраняют метаболические сдвиги, развивающиеся вследствие усиления окислительного метаболизма алкоголя, тем более выраженным гепатозащитным действием они обладают. Важным в защите печени от повреждающего воздействия в результате оксидативного стресса является не только собственный антиоксидантный эффект соединений, но и способность поддерживать высокую активность эндогенной антиоксидантной системы, нарушение функционирования которой, приводит к срыву компенсации и развитию синдрома пероксидации.

3. Изучение антиоксидантного действия флавоноидов, сухого экстракта из V. abbreviate (truncatula) и карсила in vitro и их влияния на системы АОЗ, энергетического обмена и детоксикации in vivo в условиях нормы

Исследования, проведённые in vitro и на здоровых животных после курсового введения флавоноидов, СЭ и карсила в эффективных гепатопротекторных дозах, позволили установить следующее: I. Гесперидин, диосмин и флавицин подавляют Fe2+-индуцированное ПОЛ в системе липосом и являются менее сильными антиоксидантами прямого действия, чем кверцетин (IC50 равно соответственно 7,010-2М, 4,910-2М, 4,910-3М и 6,310-5М). II. В результате курсового введения исследуемых флавоноидов в организме животных регистрируется: 1) снижение ТБК-активных продуктов крови; снижение активности антирадикальных и антиперекисных ферментов (СОД и ГП); 2) усиление глутатионовой системы (увеличение содержания GSH, активности ГР и НАДФ-редуктаз в печени); 3) снижение соотношения лактат/пируват и содержания глюкозы в печени; 4)повышение активности Mg2+АТФазы в митохондриях печени без снижения АТФ в этом органе; 5) повышение активности ферментов микросомального окисления.

Многие из выявленных эффектов флавоноидов проистекают, на наш взгляд, из природы химических свойств этих соединений, а именно способности участвовать в обратимых окислительно-восстановительных превращениях, проявляя как водороддонорные, так и водородакцепторные свойства. В силу этого биофлавоноиды могут формировать самостоятельные редокс-системы типа фенол-семихинон-хинон, что дает им возможность снижать количество и/или образование свободных радикалов и интенсивность ПОЛ и, вероятно, позволяет создавать в клетке резерв окисленных никотинамидных коферментов (NAD+; NADР+), которые могут обеспечить усиление метаболических реакций и поддержание пула восстановленного GSH, что повышает мощность эндогенной АОС. Формирование самостоятельных редокс-систем и усиление энергопродукции в ходе гликолиза может определять антигипоксическое действие флавоноидов, что помогает устранить усугубляющее влияние гипоксии и энергодефицита при развитии окислительного стресса.

Таким образом, исходя из полученных результатов, можно заключить, что механизм защитного действия биофлавоноидов против окислительного стресса, развивающегося при токсических поражениях печени, является многоплановым и многообразным. Это и прямое антиоксидантное действие в силу антирадикальных и хелатирующих свойств данных соединений. Это и непрямая защита путём активирования эндогенной системы АОЗ и детоксикации, а также повышение неспецифической устойчивости путём улучшения энергопродукции, защиты митохондрий и SH-групп белков от окислительного повреждения. Такое опосредованное повышение активности естественных защитных систем может иметь немаловажное значение в ускорении адаптации организма к действию повреждающих факторов среды. Следует подчеркнуть, что более значимым является активирование эндогенной защитной системы и оптимизация ее работы, чем собственная АОА соединений, что может достигаться, согласно последним данным литературы [Меньщикова Е.Б. и др., 2006], через активирование флавоноидами антиоксидант-респонсивного элемента (ARE), присутствующего в промоторах многих индуцибельных генов в ответ на окислительный и химический стресс.

4. Изучение влияния флавоноидов на эндотелиальную дисфункцию, продукцию NO, органный кровоток и гемореологические свойства крови

Хорошо известно положительное влияние биофлавоноидов на систему кровообращения, недостаточность которой способна усугублять метаболические нарушения, что требует коррекции гемодинамических и гемореологических расстройств при различных патологиях внутренних органов. Возможно, многие сосудистые эффекты флавоноидов связаны с их влиянием на эндотелийзависимые процессы [Benito S., 2002, Kowalczyk E., 2002, Lorenz M.,2004, Leikert J.F.,2002, Wallerath Th., 2005].

Наши исследования на животных с моделированием эндотелиальной дисфункции подтверждают данную точку зрения, демонстрируя эндотелий протективным действие гесперидина, диосмина, флавицина и кверцетина.

При тестировании эндотелиальной функции путем регистрации мозгового кровотока у крыс-самок с недостаточностью половых гормонов, получавших исследуемые флавоноиды в течение месяца в дозе 100 мг/кг, установлено улучшение реакции сосудов на ацетилхолин (стимулятор синтеза эндогенного NO), а также более выраженное снижение кровотока в ответ на введение блокатора NO-синтазы – нитро-L-аргинина по сравнению с экспериментальной патологией. Кроме этого, у животных, получавших флавоноиды, наблюдалось увеличение по сравнению с контролем степени прироста мозгового кровотока (гесперидин>кверцетин>диосмин>флавицин) в ответ на многократное введение ацетилхолина. Это позволяет сделать вывод об увеличении продукции NO эндотелиальными клетками под влиянием флавоноидов. Эндотелий протективное действие флавоноидов проявлялось и в том, что они увеличивали время тромбообразования, которое значительно снижалось у животных с дисфункцией эндотелия, располагаясь по эффективности своего действия в следующем порядке кверцетин>флавицин>диосмин>гесперидин.

Кроме того, флавоноиды на фоне эндотелиальной дисфункции оказывали корреггирующее действие на вязкость крови, уменьшали индекс агрегации эритроцитов и тромбоцитов и увеличивали индекс дезагрегации тромбоцитов, устраняли нарушение механических свойств эритроцитов (таблица 5).

Способность флавоноидов положительно влиять на функционирование сосудистого эндотелия имеет значение для нормализации органного кровотока и микроциркуляции. В опытах на наркотизированных крысах-самцах продемонстрировано улучшение печеночного кровотока при введении гесперидина и флавицина, а также показано, что данная реакция обусловлена их влиянием на эндотелий с активацией выработки NO.

Таблица 5 – Влияние флавоноидов на агрегацию тромбоцитов крови кастрированных крыс

Группы животных

Индекс агрегации тромбоцитов

Индекс дезагрегации тромбоцитов

Максимальный наклон

Интактные животные

4,8±1,52

63,2±6,09

18,9±1,14

Животные с эндотелиальной дисфункцией

15,6±3,51

+53%

54,4±6,99

-14%

53,0±0,76

+180%

Гесперидин

10,4±1,63*

-33%

60,0±7,00

+10%

35,5±1,14*

-33%

Флавицин

10,5±0,70*

-33%

64,5±7,24

+19%

42,6±4,91*

-20%

Кверцетин

12,8±0,52*

-18%

69,4±3,13*

+28%

38,3±2,95*

-28%

Диосмин

13,6±0,60

-13%

61,0±8,22

+12%

44,9±4,82*

-15%



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |
 




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.