WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 13 |

Психотропные свойства и аспекты механизмов действия новых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот

-- [ Страница 2 ] --

На основании выявленных закономерностей зависимости между структурой и активностью даны рекомендации по направленному синтезу и поиску высокоактивных и малотоксичных средств с нейропсихотропным действием в ряду структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты, которые используются химиками-синтетиками Российского государственного педагогического университета им. А.И. Герцена (г. Санкт-Петербург) и Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России.

Система методических подходов к изучению нейропсихотропной активности новых веществ, а также разработанная нами в ходе выполнения исследования, модель депрессивноподобного состояния у крыс при хроническом комбинированном стрессе со сменой разномодальных стрессоров (шума, вибрации и пульсирующего яркого света) по стохастической схеме, приводящем к формированию «выученной беспомощности» (Тюренков И.Н., Багметова В.В., Чернышева Ю.В., Бородин Д.Д., 2013) применяются в научно-исследовательской работе кафедр фармакологии, фармакологии и биофармации ФУВ ВолгГМУ. Результаты исследования используются также в учебном процессе кафедр фармакологии, фармакологии и биофармации ФУВ ВолгГМУ.

Акты о внедрении прилагаются.

Положения, выносимые на защиту:

  1. Разработка производных естественных нейромедиаторов ЦНС – ГАМК и глутаминовой кислоты является перспективным путем поиска новых высокоэффективных и безопасных нейропсихотропных лекарственных средств, с поливалентным действием, перспективных для внедрения в клиническую практику с целью лечения нервных и психических расстройств. В результате направленного поиска веществ с нейропсихотрпным действием среди новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты выделены вещества с высокой активностью, низкой токсичностью, не вызывающие развития толерантности и синдрома отмены при длительном применении, обладающие потенциально высокой лекарственной безопасностью, перспективные для разработки на их основе нейропсихотропных средств: на основе соединения РГПУ-147 (цитрат 4-амино-3-фенилбутановой кислоты, цитрокард) – средства с ноотропным, нейропротекторным и анксиолитическим действием, на основе соединения РГПУ-135 (гидрохлорид бета-фенилглутаминовой кислоты, нейроглутам) – средства с антидепрессантным, анксиолитическим, ноотропным и нейропротекторным действием.
  2. Перспективен поиск веществ с нейропсихотропным действием в химических рядах производных алифатической ГАМК и глутаминовой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заметсителями в бета-положении, солей и композиций фенибута, фенотропила и нейроглутама с органическими нейрометаболиески активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила.
  3. Введение в структуру ГАМК и глутаминовой кислоты одинаковых ароматических и гетероциклических заметителей в бета-положении приводит к получению соединений со спектром фармакологического действия, отличным от спектра действия исходных веществ, производные ГАМК и глутаминовой кислоты с одними и теми же заместителями проявляют различный спектр нейропсихотропных эффектов. Разработка солей и композиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты с органическими нейрометаболически активными кислотами не вызывает изменений профиля фармакологических эффектов исходных соединений, но изменяет их выраженность, снижает токсичность.
  4. В ряду солей и композиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты с органическими метаболически активными кислотами наиболее выраженным нейропсихотропным действием обладает соединение РГПУ-147, которое проявляет широкий спектр эффектов – ноотропный, анксиолитический, активирующий, антиагресивный а также умеренные анальгетические и антидепрессантные свойства.
  5. В ряду производных алифатической ГАМК и глутаминовой кислоты с гетероциклическими и ароматическими заметсителями в бета-положении наиболее выраженным нейропсихотропым действием обладает соединение РГПУ-135, на основе которого разрабатывается средство с антидепрессивным, анксиолитическим и нейропротекторным действием (государственный контракт с Минпромторгом РФ № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011 г).
  6. Нейропсихотропное действие нейроглутама связано со способностью стимулировать дофамин- и серотонинергическую нейропередачу без прямого связывания с Д2- и 5НТ2-рецепторами, модулировать трансмембранные натриевые, калиевые и, в большей степени, кальциевые ионные токи, а также внутриклеточные потенциалы нейронов.

Личный вклад автора

Автором проведен анализ литературы по теме исследования, разработан дизайн исследования, сформулированы основные положения, выносимые на защиту, выводы и научно-практические рекомендации. По результатам анализа литературы автором подобраны, освоены и адаптированы к имеющейся материальной базе кафедры фармакологии и биофармации ФУВ ВолгГМУ психофармакологические модели и методы, составляющие данное исследование; по инициативе автора проведены закупка и изготовление оборудования для выполнения поведенческих тестов. При непосредственном участии автора проведено планирование, подбор методов и разработка протоколов всех поведенческих экспериментов, входящих в настоящее исследование и выполненных на базе кафедры фармакологии и биофармациии ФУВ ВолгГМУ, а также проведено порядка 80% экспериментов. Лично автором выполнен анализ результатов данных экспериментов, их статистическая обработка и описание. При личном участии автора, в рамках настоящей диссертационной работы, подготовлен проект, выигравший открытый конкурс на право заключения государственных контрактов с Минпромторгом России на выполнение научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ (НИОКР) по федеральной целевой программе «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу», утвержденной постановлением Правительства Российской Федерации от 17 февраля 2011 г. № 91 (лот №3; Уникальный номер закупки 133/13-ФМП-12.07ок.), по результатам конкурса заключен государственный контракт № 11411.18700.13.089 от 13.09.2011 г. Часть экспериментальных работ (не более 20%), посвященных изучению нейропсихотропной активности и механизмов действия наиболее активного соединения, выполнено на базах других кафедр и учреждений в рамках указанного государственного контракта. При личном участии автора по материалам диссертации подготовлены патенты РФ на изобретения и публикации.





Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы были представлены на научно-практических конференциях: IX, X, XI, XII, XIII Региональная конференция молодых исследователей Волгоградской области (Волгоград, 2004 - 2008); XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XIX, XX Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 2006 - 2010, 2012, 2013); Международная научно-практическая конференция «Фармация и здоровье» (Пермь, 2005); 4-я и 5-я Международные конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 2006, 2010); Научно-практическая конференция «Проблемы клинической фармакологии и моделирования в фармакологии и биомедицине» (Ростов-на-Дону, 2006); III Cъезд фармакологов России «Фармакология – практическому здравоохранению» (Санкт-Петербург, 2007); IV Съезд фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 2012); Научная конференция «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2008); Научный симпозиум «Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств» (Москва, 2008); Х Международный конгресс «Здоровье и образование в ХХI веке «Инновационные технологии в биологии и медицине», (Москва, 2009); II Всероссийский научно-практический семинар молодых ученых «Методологические аспекты экспериментальной и клинической фармакологии» (Волгоград, 2010); 3-й Международный конгресс Армении (Ереван, 2011); IV Всероссийский научно-практический семинар молодых ученых с международным участием «Современные проблемы медицинской химии. Направленный поиск новых лекарственных средств» (Волгоград, 2012).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 128 печатных работ, в том числе 27 в журналах, рекомендованных ВАК, 3 патента РФ на изобретения.

Объем и структура диссертации:

Диссертация изложена на 420 страницах машинописного текста и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, 7 глав собственных исследований, обсуждение результатов, выводы, научно-практические рекомендации, список литературы, содержащий 377 источников, из них 128 отечественных и 249 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 124 рисунками и содержит 67 таблиц.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проведено на 1530 самцах и самках крыс массой 180-220 г и 756 самцах и самках мышей массой 18-24 г, 60 аутбредных мышах самцах линии Balb/c и 60 аутбредных мышах самцах линии C57Bl/6, полученных из Филиала "Столбовая" ГУ НЦБМТ РАМН, ФГУП «Питомника лабораторных животных «Рапполово» РАМН. Проведение экспериментов и содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 и ГОСТ Р-51000.4-2011), Федеральному закону № 61-ФЗ от 12.04.2010 г. «Об обращении лекарственных средств», Приказу Минздравсоцразвития России от 23.08.2010 № 708Н «Об утверждении правил лабораторной практики» (GLP), ГОСТ Р-53434-2009, с учетом международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997), одобрено Региональным Независимым Этическим Комитетом (ГУ Волгоградский Медицинский Научный Центр): протокол № 140-2011 от 11.06.2011 г.

В работе изучена нейропсихотропная активность 35 новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты1: производных алифатической ГАМК (n=4) и глутаминовой кислоты (n=7) с гетероциклическими и ароматическими заместителями в бета-положении, солей и композиций фенибута (n=7), фенотропила (n=5) и нейроглутама (n=4) с органическими метаболически активными кислотами, полифункционально замещенных производных фенотропила (n=8). При разработке солей и композиций структурных аналогов ГАМК и глутаминовой кислоты использовали органические кислоты: лимонную, янтарную, яблочную, никотиновую, глутаминовую, салициловую, ацетилсалициловую.

Изучение нейропсихотропных эффектов новых производных ГАМК и глутаминовой кислоты проведено с использованием стандартных нейропсихофармакологических моделей и методов, изложенных в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» - Фармакологический государственный комитет, МЗ РФ, Москва, 2005», «Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств» - ч. 1, Москва, 2012: «открытое поле» (ОП), «приподнятый крестообразный лабиринт (ПКЛ), «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ), «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ), «подвешивание мышей за хвост» (ПМХ), «принудительное неизбегаемое плавание» по Порсолту, «потребление/предпочтение сахарозы» (П/ПС), «конфликтная ситуация по Vogel», «пролонгирование снотворного действия барбитуратов», «подвешивание на горизонтальной сетке», «принудительное неизбегаемое плавание с грузом», «раздражение лап электрическим током до вокализации», «tail immersion», модели неконкурентного и конкурентного агрессивного поведения в условиях спровоцированной внутривидовой агрессии, «максимальный электрошок» (МЭШ). При углубленном сравнительном изучении нейропсихотропного действия наиболее активных соединений и известных препаратов с близким спектром действия использовали метод изучения пространственной памяти в условиях 8-лучевого радиального лабиринта с равномерным распределением пищевого подкрепления (Островская Р.У. и др., 1995; Трофимов С.С. и др., 2000), метод парного взаимодействия (Петров В.И. и др., 1996), а также разработанную нами модель депрессивноподобного состояния у крыс при хроническом комбинированном стрессе со сменой разномодальных стрессоров (шума, вибрации и пульсирующего яркого света) по стохастической схеме, приводящем к формированию «выученной беспомощности» (Тюренков И.Н., Багметова В.В., Чернышева Ю.В., Бородин Д.Д., 2013).

На различных этапах исследования применяли следующие вещества и препараты сравнения: в дозах, численно равных 1/10 от молекулярной массы фенибут – 18, фенотропил, баклофен – 22, толибут - 19 мг/кг (в виде субстанций, синтезированных на кафедре органической химии Российского государственного педагогического университета им. А.Н. Герцена (Санкт-Петербург, Россия), а также в терапевтически эффективных дозах: диазепам (Simplex pharma Pvt. Ltd.) – 1 мг/кг (Т.А. Воронина, 2006), амитриптилин (10 мг/кг) (р-р 10 мг/мл; ФГУП «Московский эндокринный завод», Москва, Россия); имипрамин (15 мг/кг) (Мелипрамин, р-р 25 мг/2 мл; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия); сертралин (10 мг/кг) (Стимулотон, таб., покр. пл. об. 100 мг; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия); пароксетин (10 мг/кг) (Паксил, таб., покр. об. 20 мг; Брашов, Румыния; GlaxoSmithKline); флуоксетин (20 мг/кг) (Флуоксетин-Канон, капс. 20 мг; ЗАО «Канонфарма продакшн», Щелково, Россия); венлафаксин (10 мг/кг) (Велаксин, таб. 75 мг; ОАО Фармацевтический завод ЭГИС, Будапешт, Венгрия). Применялись также: тиопентал натрий (лиофилизат для приготовления р-ра для в/в введения 1 г; Синтез АКО ОАО, Россия); янтарная кислота (ACS, США); яблочная кислота (AppliChem, Германия); лимонная кислота (AppliChem, Германия); салициловая кислота (Panreac; Barcelona, Espaa); L-глутаминовая кислота (Panreac; Barcelona, Espaa); гамма-аминомасляная кислота (Sigma-Aldrich, Германия); крахмал картофельный (ГОСТ 7699-78, высший сорт, Беларусь).

На каждом этапе исследования формировались контрольные группы животных, которые получали дистиллированную воду либо 2%-ую крахмальную слизь.

На начальном этапе изучения возможных механизмов нейропсихотропного действия нейроглутама использовали метод компьютерного прогноза спектра рецепторной активности с помощью системы PASS2 (Филимонов Д.А., Поройков В.В., 2006).

Нейрофармакологический анализ взаимодействия нейроглутама с основными нейромедиаторными системами ЦНС in vivo проводили в тестах по изучению влияния тестируемого соединения на эффекты агонистов и антагонистов основных нейромедиаторных систем ЦНС (Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, 2012). Использовались: пикротоксин 2,5 мг/кг, апоморфин 1 мг/кг (Sigma, США), галоперидол 1 мг/кг (Lake Chemikals PVT. LTD, Индия), клофелин 0,1 мг/кг (Минмедпром объединение им. 60-летия СССР, Россия), ареколин 25 мг/кг (Aldrich, Германия), никотин 5 мг/кг (Sigma, Германия), 5-окситриптофан 300 мг/кг (Sigma, Германия).

С целью нейрофармакологического анализа специфического психостимулирующего действия нейроглутама оценивали его влияние на спонтанную локомоторную активность инбредных мышей линий Balb/c и C57Bl/6 с использованием инфракрасного актиметра фирмы Panlab (Испания) с программным обеспечением ActiTrack3.

Нейрохимический анализ влияния вещества РГПУ-135 на содержание моноаминов и их метаболитов определялось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией (ВЭЖХ/ЭД) на хроматографе LC-304T (BAS, West Lafayette, США) с инжектором Rheodyne 7125 (И.И.Мирошниченко, 1988)4.

Радиолигандный анализ связывания с рецепторами компетентных структур мозга крыс выполнен с применением стандартных радиолигандов [3H]-MK-801, [3H]-кетансерина, [3H]-сульпирида, [3H]-SR95531 и [3H]-баклофена («PerkinElmer») в соответствии с рекомендациями IUPHAR (“Guide to Receptors and Channels”, S.P.H.Alexander, A.Mathie and J.A.Peters, BJP, v.147, Suppl.3, 2006)5.

Нейрофизиологический анализ влияния нейроглутама на трансмембранные ионные токи внутриклеточные потенциалы нейронов моллюсков прудовика большого (Lymnaea stagnalis) и катушки роговой (Planorbarius corneus) проводили методом внутриклеточной перфузии изолированных нейронов и фиксации мембранного потенциала с помощью аналого-цифрового преобразователя фирмы «L-Card» (Россия) L-7916.

Таблица 1.

Дизайн исследования: психотропные свойства и аспекты механизмов действия новых производных гамма-аминомасляной и глутаминовой кислот

Наименование этапа исследования

Нейропсихофармакологические модели и методы

Изучаемые производные ГАМК и глутаминовой кислоты, препараты сравнения



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 13 |
 




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.