WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||

Аутоантитела к фактору некроза опухоли при ревматоидном артрите и бронхиальной астме

-- [ Страница 4 ] --

Данные представлены в виде медианы и межквартильного интервала и выражены в нг/мл. Достоверность различий определена с помощью критерия Манна-Уитни. * - достоверно (p<0,05) по сравнению с условно здоровыми донорами; # - достоверно (p<0,05) по сравнению с больными РА в стадии обострения; $ - достоверно (p<0,05) по сравнению с больными БА с неконтролируемым течением.

В данной работе методом твердофазного ИФА было измерено абсолютное содержание аутоантител к TNF всех четырех подклассов IgG, при этом в качестве калибровочного материала была использована чистая фракция аутоантител, полученная из пулированных сывороток крови условно здоровых доноров (табл. 4). Предварительно в очищенной фракции аутоантител к TNF с использованием коммерческого ИФА-набора было измерено содержание подклассов IgG, которое составило 46 нг/мл субкласса IgG1, 102 нг/мл субкласса IgG2, 24 нг/мл субкласса IgG3 и 48 нг/мл субкласса IgG4.

В нашей работе для больных РА, как в стадии обострения, так и больных РА, ответивших на терапию, было показано, что среди подклассов аутоантител к TNF достоверно превалируют IgG1 и IgG3 (рис. 6). При этом была получена положительная корреляция между содержанием подклассов IgG2 и IgG3 у больных РА в стадии обострения.

Также была получена положительная корреляция между содержанием в сыворотках крови условно здоровых доноров аутоантител к TNF подклассов IgG1 и IgG3.

Для больных БА с неконтролируемым течением заболевания было показано, что среди подклассов аутоантител к TNF достоверно превалируют IgG1 и IgG3 (рис. 7А). В тоже время в сыворотках крови больных БА с контролируемым течением (рис. 7Б) и условно здоровых доноров (рис. 8) содержание аутоантител к TNF подкласса IgG1 достоверно превышает содержание прочих подклассов, а содержание аутоантител к TNF подкласса IgG3 достоверно выше IgG2 и IgG4.

Ранее в работах нескольких групп исследователей было показано, что у пациентов с аутоиммунными заболеваниями специфические аутоантитела чаще всего представлены подклассами IgG1 и IgG3 [Gharavi A.E., 1988; Maran R., 1997; Yount W.J., 1988]. Так у больных РА аутоантитела к нативному коллагену II типа являются комплементсвязывающими и принадлежат к IgG1 (55%) и IgG3 (47%) подклассам [Cook A.D., 1997]. Полученные результаты также указывают на то, что распределение аутоантител к TNF по подклассам как в сыворотках больных РА и БА, так и условно здоровых доноров не совпадает с известным распределением антител к чужеродным антигенам (IgG1 > IgG2 > IgG3 > IgG4) [Furukawa K., 1991], а IgG1 и IgG3 подклассы доминируют над IgG2 и IgG4. Превалирование среди аутоантител к TNF IgG1 и IgG3 подклассов может указывать на активное участие аутоантител к TNF в активации системы комплемента, так как известно, что по способности взаимодействовать с С1q компонентом комплемента иммуноглобулины IgG1 и IgG3 подклассов стоят на первом месте, при этом IgG2 способен к слабому связыванию, а IgG4 вовсе не связывается с С1q [van Loghem E., 1986].

Полученная для условно здоровых доноров корреляция связывает два комплементсвязывающих подкласса аутоантител к TNF. При обострении РА данная корреляционная зависимость нарушается, и появляется корреляция между IgG2 и IgG3 подклассами аутоантител к TNF.

Было показано, что у больных РА в стадии обострения и больных БА с неконтролируемым течением абсолютное содержание подклассов аутоантител IgG2, IgG3 и IgG4 достоверно выше по сравнению с условно здоровыми донорами (табл. 4). При переходе от неконтролируемого к контролируемому течению БА, а также после ответа на терапию при РА достоверно снижается содержание IgG2 и IgG4. Из двух подклассов аутоантител, уровень которых падает при переходе от неконтролируемого к контролируемому течению БА и при ответе на терапию больных РА один, IgG2, способен слабо активировать комплемент, а второй, IgG4, вовсе не активирует систему комплемента по классическому пути. При этом существует положительная корреляция между содержанием IgG2 и TNF у больных БА с контролируемым течением. Исходя из чего, можно предположить, что аутоантитела к TNF подклассов IgG2 и IgG4 регулируют иммунные реакции при РА и БА путем связывания TNF посредством образования иммунных комплексов с увеличением длительности его существования в системной циркуляции и транспорта иммунных комплексов в органы и ткани, а также, возможно, способны усиливать эффект цитокина.

Анализ содержания подкласса IgG1 показал, что при БА содержание данного подкласса достоверно повышается при переходе от неконтролируемого к контролируемому течению заболевания, и при этом содержание IgG1 у больных БА с контролируемым течением достоверно выше по сравнению с условно здоровыми донорами, и, таким образом, можно сделать предположение о нейтрализующем действие аутоантител данного подкласса в отношении TNF.

В дополнение к вышесказанному, наличие положительной корреляции между содержанием подкласса IgG2 у больных РА в стадии обострения и больных РА, ответивших на терапию, может указывать на возможность рассмотрения снижения содержания IgG2 в качестве показателя ответа на терапию больных РА. Аналогично, положительная корреляция между содержанием подкласса IgG1 у больных БА с неконтролируемым и контролируемым течением может указывать на возможность рассмотрения повышения содержания IgG1 в качестве показателя перехода от неконтролируемого к контролируемому течению БА, соответственно.



Полученные достоверные отличия в содержании как IgG2 и IgG4, так и IgG3 подклассов у больных РА в стадии обострения по сравнению с условно здоровыми донорами могут говорить об их участии в патогенезе РА, а достоверные отличия в содержании IgG1 у больных БА с контролируемым течением и IgG2, IgG3 и IgG4 подклассов у больных БА с неконтролируемым течением по сравнению с условно здоровыми донорами могут свидетельствовать об участии в патогенезе БА всех четырех подклассов IgG.

ВЫВОДЫ

1. Содержание TNF и растворимых рецепторов к TNF достоверно выше у больных ревматоидным артритом и бронхиальной астмой по сравнению с условно здоровыми донорами, при этом после ответа на терапию больных ревматоидным артритом и при переходе к контролируемому течению бронхиальной астмы уровень TNF достоверно снижается, что подтверждает активное участие цитокина TNF в патогенезе обоих заболеваний.

2. Разработанный способ получения аутоантител к TNF из сыворотки крови, включающий методы аффинной хроматографии и процедуру магнитной сепарации, позволяет получить фракции аутоантител к TNF с подтвержденным, методами ИФА и электрофореза, соответствием и чистотой.

3. Аутоантитела к TNF обнаруживаются в сыворотке крови условно здоровых доноров и больных ревматоидным артритом и бронхиальной астмой, при этом для них характерно преобладание IgG1 и IgG3 подклассов над IgG2 и IgG4 подклассами, что совпадает с распределением по подклассам IgG специфических аутоантител у пациентов с аутоиммунными заболеваниями.

4. Показано достоверное увеличение относительного и абсолютного содержания аутоантител подклассов IgG2, IgG3 и IgG4 в сыворотках крови больных ревматоидным артритом в стадии обострения и бронхиальной астмой с неконтролируемым течением по сравнению с условно здоровыми донорами, что свидетельствует об участии аутоантител к TNF в патогенезе данных заболеваний.

5. Обнаружено снижение абсолютного и относительного содержания аутоантител подклассов IgG2 и IgG4 у больных ревматоидным артритом после ответа на терапию, и снижение абсолютного и относительного содержания IgG2 и IgG4 и повышение абсолютного содержания аутоантител подкласса IgG1 у больных бронхиальной астмой при переходе от неконтролируемого к контролируемому течению, что указывает на функциональную роль подклассов IgG аутоантител к TNF в изменении активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите и бронхиальной астме.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Киреев Ф.Д., Голикова Е.А., Соснина А.В., Аутеншлюс А.И. Уровни ФНО-, растворимых рецепторов I и II типов и аутоантител к ФНО- у больных туберкулезом легких и здоровых доноров // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2011. – T. 35. – № 2/1. – C. 147.

2. Киреев Ф.Д., Лопатникова Ю.А., Соснина А.В., Голикова Е.А., Аутеншлюс А.И., Сенников С.В. Аутоантитела к фно-альфа у здоровых доноров: содержание и биологическая активность // Дни иммунологии в Сибири: материалы Всероссийской научно-практической конференции. – 2011. – C. 58.

3. Голикова Е.А., Лопатникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Сизиков А.Э., Сенников С.В. Система ФНО-альфа у больных ревматоидным артритом // Медицинская иммунология: материалы XIV Всероссийского научного форума с международным участием имени академика В.И.Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» 23-26 мая 2011. – 2011. – Т.13. – №4-5. – С. 364.

4. Лопатникова Ю.А., Киреев Ф.Д., Голикова Е.А., Сенников С.В. Эффекты аутоантител к ФНО-альфа в тестах in vitro // Медицинская иммунология: материалы XIV Всероссийского научного форума с международным участием имени академика В.И.Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» 23-26 мая 2011. – 2011. – Т.13. – № 4-5. – С. 316.

5. Голикова Е.А., Лопатникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Киреев Ф.Д., Сизиков А.Э. Система ФНО- у больных ревматоидным артритом и условно-здоровых доноров // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2011. – Т. 35. – № 2/1. – С. 125.

6. Лопатникова Ю.А., Киреев Ф.Д., Голикова Е.А., Аутеншлюс А.И., Соснина А.В., Сенников С.В. Содержание растворимых рецепторов и аутоантител к TNF- у здоровых индивидов и биологическая активность анти-TNF- аутоантител // Российский иммунологический журнал. – 2011. – Т. 5(14). – №3-4. – С. 360-366.

7. Голикова Е.А., Лопатникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Сизиков А.Э., Сенников С.В. Система ФНО-альфа: медиатор, растворимые рецепторы и аутоантитела, в норме и при ревматоидном артрите // Иммунопатогенез и иммунотерапия основных заболеваний человека: от эксперимента к клинике: материалы 8-й отчетной конференции НИИКИ СО РАМН. – 2011. – С. 99-101.

8. Лопатникова Ю.А., Киреев Ф.Д., Голикова Е.А., Сенников С.В. Биологическая активность аутоантител к ФНО-альфа // Иммунопатогенез и иммунотерапия основных заболеваний человека: от эксперимента к клинике: материалы 8-й отчетной конференции НИИКИ СО РАМН. – 2011. – С. 40-42.

9. Голикова Е.А., Лопатникова Ю.А., Ковалевская-Кучерявенко Т.В., Непомнящая В.М., Сенников С.В. TNF, растворимые рецепторы и аутоантитела к TNF при бронхиальной астме и у условно здоровых доноров // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2012. – Т. 41. – № 4. – С. 104-105.

10. Голикова Е.А., Лопатникова Ю.А., Шкаруба Н.С., Сизиков А.Э., Сенников С.В. TNF, растворимые рецепторы и аутоантитела к TNF у больных ревматоидным артритом и условно здоровых доноров. // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2012. – Т. 85. – № 3. – Ч. 2. – С. 67-71.

11. Sennikov S.V., Golikova E.A., Kireev F.D., Lopatnikova J.A. Purification of human immunoglobulin G autoantibodies to tumor necrosis factor using affinity chromatography and magnetic separation. // J. Immunol. Methods. – 2013. – V. 390. – P. 92-98.

12. Golikova E.A., Lopatnikova J.A., Kovalevskaya-Kucheryavenko T.V., Nepomnyashih V.M., Sennikov S.V. Levels of TNF, TNF autoantibodies, and soluble TNF receptors in patients with bronchial asthma. // J. Asthma. – 2013. –doi:10.3109/02770903.2013.796972.

Приоритетная справка на изобретение № 2012124854 от 14.06.2012. « Способ аффинного выделения аутоантител класса IgG к иммунорегуляторному цитокину TNF». Сенников С.В., Лопатникова Ю.А., Голикова Е.А., Киреев Ф.Д.



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 ||
 


Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.