WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 

Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |

Становление медиаторного этапа нервного аппарата челюстно-лицевой области в пренатальном онтогенезе человека и лабораторных животных

-- [ Страница 3 ] --

Стоматологическое обследование складывалось из нескольких основных этапов: опроса, инструментальных и лабораторных методов обследования. Полученные данные вносились в модифицированную карту обследования, разработанную на основе предложенной ВОЗ (1999), в которой содержались сведения о возрасте, перенесенных и сопутствующих заболеваниях, субъективных и объективных данных состояния зубов, пародонта, слизистой оболочки полости рта, характере и режиме питания. Определение стоматологического уровня здоровья проводилось по П.А. Леусу.

2.3 Оценка влияния факторов риска

Для оценки факторов риска было проведено исследование «случай-контроль» и проанализированы вероятные факторы риска ВПР ЧЛО. Объектом стали женщины, родившие детей с ВПР ЧЛО (основная группа) и женщины, родившие детей без ВПР (группа сравнения). Исследование проводилось на основании данных анкетирования за 3 года. Всего в работе проанализированы анкеты 1158 женщин. В основную группу вошли 386 женщин, родившие детей с ВПР ЧЛО (Q35-Q37 по МКБ X) и 772 женщины, родившие детей без ВПР. Семьи дали информированное согласие на участие в исследовании. Для достоверности результатов формировались группы, сходные по признакам: возраст, беременность, место проживания. Различие между группами должно было состоять только в факте наличия (основная группа) или отсутствия (группа сравнения) ВПР ЧЛО у родившегося ребенка. Исследование, преимущественно, было направлено на изучение факторов риска, связанных с состоянием здоровья матери, ее социально-бытовым статусом, особенностями питания и режима, а также медико-бытовых факторов, воздействовавших в течение раннего внутриутробного развития. Для этого нами были разработаны специальные вопросники, которые женщинам было предложено заполнить. В основном вопроснике содержались демографические данные; сведения по репродуктивной сфере, бытовых и социальных условиях жизни, а также по поводу вредных привычек и наличию других воздействий на ранних сроках беременности. Второй вопросник касался качественного и количественного приема пищи, был разработан с учетом региональных особенностей.

Следующий этап состоял в оценке воздействия изучаемых факторов риска. Ретроспективно оценивалась частота воздействия возможных факторов риска в обеих группах.  Для оценки факторов риска развития ВПР ЧЛО в обследованной популяции мы применили статистический показатель соотношение шансов ((Odds Ratio) или OR в англоязычной литературе), который в последние годы широко используется в зарубежных медицинских сообщениях. Отношение шансов рассматривается как отношение числа больных, имеющих фактор риска, к числу не имеющих его в опытной и контрольной группах. Этот показатель принимает значения от 0 до бесконечности и равен 1 только при отсутствии зависимости. Чем больше значение показателя OR, тем больше относительный риск развития патологии, связанной с наличием этого фактора.
Кроме того, нами был применен способ множественной логистической регрессии (В. И. Сердюченко, Е. И. Драгомирецкая, 2008), который позволяет оценить совместное влияние многих факторов на зависимую переменную, принимающую два значения (есть ВПР ЧЛО - 1, нет ВПР ЧЛО - 0). После сбора, проверки, группировки и сводки данных была проведена их статистическая обработка с использованием пакета прикладных программ для машинной обработки. Математическое моделирование риска развития ВПР ЧЛО проводили в несколько этапов: обоснование сравнимости исследуемых групп, выбор метода обработки результатов, статистический анализ полученного материала и компьютерная обработка с использованием стандартных и авторских программных продуктов.

Результаты собственных исследований и их обсуждение

Основные этапы и закономерности развития иннервации челюстно-лицевого аппарата в пренатальном онтогенезе

В течение эмбрионального периода человека (точнее во второй его половине) в результате дисперсии кле­ток изначально компактных парасимпатических узлов головы вдоль их периферических ветвей формируется система узлов с наличием глав­ного и связанных с ним дополнительных микроганглиев.

У всех изученных эмбрионов самой крупной ветвью тройничного нерва на протяжении всего исследуемого периода являлась третья ветвь. Верхнечелюстная и глазничная ветви были примерно одина­ковой толщины.

Процесс формирования ветвей тройничного нерва протекает в опре­деленной последовательности: первоначально каждая из основных вет­вей представляется в виде короткого ствола, состоящего из переплетаю­щихся, извитых нервных волокон. Затем количество волокон увеличива­ется, они становятся прямыми и лежат параллельно. В это время начинается формирование ветвей второго порядка, которые в строении повторяют раннюю стадию развития основных ветвей тройничного нер­ва.

 агиттальный срез эмбриона 17 ст. Импрегнация по Бильшовскому-Буке.-0

Рис. 1 сагиттальный срез эмбриона 17 ст. Импрегнация по Бильшовскому-Буке. Об. 10. Ок.10

В дальнейшем главные ветви узла тройничного нерва приобретают пучковидное строение сначала в местах отхождения от узла, а затем на всем протяжении. К этому времени вторичные ветви состоят из прямых нервных волокон, формирующих компактный ствол. Наконец, в составе основных ветвей тройничного нерва нарастает количество пучков, и вто­ричные ветви также приобретают пучковидное строение.

Рис. 2 - срез эмбриона 18 ст. Импрегнация по Бильшовскому-Буке. Об. 10. Ок.10





Процесс развития и дифференцировки ветвей тройничного нерва распро­страняется от центра (от узла) к периферии.

На протяжении исследованного периода развития эмбрионов чело­века в построении ветвей тройничного нерва можно выделить 4 стадии.

На первой стадии ветви тройничного нерва состоят из сильно извитых, переплетающихся между собой нервных волокон; на второй стадии ветви тройничного нерва представлены рыхлым пучком и формируют вторич­ные нервные стволы и закладки двигательных ветвей; на третьей стадии ветви тройничного нерва представлены компактными стволами, форми­руют все вторичные ветвления, характерные для дефинитивного состоя­ния; на четвертой стадии происходит удлинение ветвей, нарастает коли­чество конечных ветвлений чувствительных и двигательных нервов и на­чинает выявляться пучковидное строение основных стволов тройничного нерва.

Флуоресцентно - гистохимическое исследование

Единичные холинергические нейроны со слабовыраженной реакцией на сульфид меди впервые выявлялись у 8-и недельных эмбрионов. Такие нейроны, в количестве 8-11 на одном срезе, располагались в центре и на периферии тройничного ганглия.

Также, единичные холинэстераза-положительные нейроны встречались по ходу нервных волокон растущих ветвей n. glossoрharyngеus, n. maxillaries, n. mandibularis, по ходу нервных волокон лицевого нерва, в месте отхождения большого каменистого нерва и по ходу барабанной струны, узле коленца и близлежащих узлах статически-слухового нерва, по ходу нервных волокон растущих ветвей блуждающего нерва, но в значительно большей степени они выявлялись на стенке пищевода в составе пищеводного сплетения, в шейных спинномозговых узлах.

 Флуоресценция катехоламинов (зеленое) и серотонина (желтый) вдоль-2

Рис. 3 - Флуоресценция катехоламинов (зеленое) и серотонина (желтый) вдоль небной артерии. Стадия 23. Инкубация в глиоксиловой кислоте. Об. 10. Ок. 10

Исследование срезов с инкубацией в глиоксиловой кислоте для выявления катехоламинов показало появление единичных интенсивно флюоресцирующих нейронов (SIF cells) у 10-и недельных эмбрионов. Единичные SIF-нейроны располагались вблизи скоплений нейробластов, формирующих каудальный и краниальный ганглии n. glossoрharyngеus и n. vagus, а также по ходу их ветвей, вблизи формирующихся последовательно ganglion ciliare, ganglion pterygopalatinum и ganglion oticum, а также по ходу ветвей тройничного нерва, вблизи группы нейронов, формирующих узел коленца, рядом со скоплениями нейробластов, формирующими каудальный и краниальный ганглии блуждающего и языкоглоточного нервов, а также по ходу их ветвей, возле скоплений симпатобластов, формирующих ganglion axillar superior, затем ganglion vertebrale и ganglion stellatum.

Между краниальными ганглиями блуждающего и языкоглоточного нервов, а также вблизи Гассерова узла, вокруг всех ганглиев pars cervicalis truncus symphaticus во всех случаях наблюдались 1-2 мелких параганглия содержащие клетки со слабой специфической флюоресценцией цитоплазмы и нелюминесцирующими ядрами.

Также, в большинстве случаев наблюдений, по ходу сино-каротидной ветви n. glossoрharyngеus, по ходу n. ophtalmicus, n. maxillaris и n. mandibularis, по ходу ветвей лицевого нерва, чаще в местах ветвления их, по ходу межузловых ветвей шейного отдела симпатического ствола выявлялась группа нейронов, выказывавших слабую специфическую флюоресценцию катехоламинов.

На последовательных стадиях развития челюстно-лицевого аппарата люминесцентно-гистохимическими методами исследования на 16 стадии эмбриогенеза выявляются люминесцирующие кровеносные сосуды, а затем, на 19 стадии, в них определяются нервные волокна, содержащие ацетилхолин, позднее, на 20 стадии появляются серотонинсодержащие, а на 22 стадии – катехоламинсодержащие клетки. Появление первичных кровеносных сосудов в ЧЛО с большой площадью ветвления совпадает с образованием первичного неба. В местах расположения медиаторспецифичных нервных окончаний наблюдаются участки дифференцировки мезенхимы.

Наибольшее содержание серотониновых рецепторов отмечается на 22 стадии развития, что предшествует образованию вторичного неба.

Появление SIF-клеток совпадает с ускорением процессов гистогенеза и дифференцировки клеток области рта и носа.

. Тройничный ганглий. Метод Фалька-Хилларпа. Об.40. Ок.10.-3

Рис. 4 -. Тройничный ганглий. Метод Фалька-Хилларпа. Об.40. Ок.10. Изображение обработано в ПО «Морфотест»

Таким образом, имеющаяся связь по содержанию нейромедиаторов в мезенхимальных структурах развивающегося ЧЛО, а также в медиаторспецифичных нервных окончаниях может быть в основе одного из важных механизмов роста и дифференцировки клеток в процессе формирования вторичного неба. Мы предполагаем, что исследуемые нейромедиаторы могут являться индукторами дифференцировки тканей в процессе раннего пренатального развития.

Влияние дефицита нейротрансмиттеров крови матери на развитие ЧЛО эмбриона

Через 1 сутки после экспериментального воздействия, состоявшего в блокировании нейромедиатора (независимо от его вида) в крови беременной самки крысы, у плода в разных отделах развивающегося тройничного ганглия регистрируется гибель нейральных клеток. Группы апоптотических телец обнаруживаются в тройничном узле, а также по ходу верхнечелюстного нерва и артерии. Достаточно часто погибшие клетки можно встретить в просвете верхнечелюстной артерии, куда выводятся остатки погибших клеток из нейроэпителиального пласта.

 Срез ЧЛО эмбриона крысы. Импрегнация по Бильшовскому-Буке. Об. 10.-4

Рис.5 - Срез ЧЛО эмбриона крысы. Импрегнация по Бильшовскому-Буке. Об. 10. Ок.10

Изменения нервного аппарата при моделировании дефицита ацетилхолина

У крыс группы сравнения нервные элементы ЧЛО были представлены небольшим ганглиозным аппаратом и единичными нейронами с многочисленными нервными волокнами, распространяющимися от тройничного узла в сторону тканей-мишеней и теряющихся в этих тканях.

Рис. 6 – Срез эмбриона крысы. Окраска по Домашевской Е.И., Мельниченко Т. В. Об. 20. Ок.10

В динамике эксперимента у крыс наблюдали выраженные изменения в нервном аппарате, которые имели тенден­цию к нарастанию. Значительно увеличивалось ко­личество ганглионарных нейронов, находящихся в состоянии дистрофии и атрофии. Наиболее измененными оказались нейрон-содержащие периартериальные области, в несколько меньшей другие. Среди скоплений ганглиозных клеток выявлялись истин­ные явления нейронофагии и сателлитоз. Не­равномерность хода нервных элементов нарастала. Среди нейроцитов обнаруживались также клетки с пикнозом ядер, вакуоли­зацией цитоплазмы. Единичные ганглионарные клетки подвергались невролизу.

Морфометрические исследования подтвердили указанные положения. Максимальная плотность нейронов выявлялась в периартериальной и межчелюстной областях, и там же отмеча­лись максимальные изменения этого показателя при нарастании срока. Размеры ядер нейронов зависели от локализации в несколько меньшей степени, но варьировали по тем же закономерностям. В максимальной сте­пени уменьшалась средняя площадь сечения ядер ганглионарных клеток, расположенных в периартериальной и межчелюстной областях (все Р<0,01). В периартериальной области и, в меньшей степени, венозной области плотность нервных элементов при развитии дефицита медиатора достоверно увеличивалась, а в межчелюстной области - прогрессивно уменьшалась (все Р<0,01). Увеличение плотности обычно сопровождалось некоторым утолще­нием нервных волокон.

Таким образом, развитие состояния дефицита нейромедиатора сопровождалось характер­ными изменениями вегетативных элементов ЧЛО, кото­рые затрагивали как тела ганглионарных клеток, так и проводящие нервные элементы.

Рис.7 – Клетки тройничного узла эмбрионов основной группы. Окр. толуидин. Об. 40. Ок. 10

При исследовании под большим увеличением были обнаружены более дифференцированные изменения нейроцитов и нервных волокон в ткани ЧЛО. Большинство нейронов нахо­дилось в состоянии острого раздражения или дегенерации вплоть до нейролиза с формированием «клеток-теней». На этом фоне отчетливо было за­метно появление гиперхромных нейроцитов с большим количеством хоро­шо окрашенных отростков, что свидетельствовало об их функциональной активности. Имелись также единичные двуядерные нейроны. Сателлитоз не был столь резко выраженным.

Рис. 8 – Клетки узла на 16 день. Серебрение. Об.40. Ок.10

При окраске по Нисслю и серебрении подтверждалась выраженная мозаичность поражения нейронов. Гиперхроматоз отдельных нейронов со­четался с дистрофией и нейролизом других клеток. Часть нейронов имела вид клеток-теней.

Рис.9 – Срез головного конца эмбриона основной группы. Окр. Бильшовский-Буке. Об. 10. Ок. 10

Характерной была мозаичная аргентофилия нейронов, набухание и извитость нервных волокон.

Густота ветвления нервных волокон и форма окончаний изменилась: вместо равномерного трехмерного рисунка с отчетливыми слоями нервные элементы местами исчезали или образовывали ис­кривленные короткие кустикообразные скопления, а в отдельных местах - образовывали плотные ориентированные скопления, направленные вглубь (рис. 10).

 Срез ЧЛО эмбриона основной группы (16 день). Окр. H&E. О. 10.-9

Рис. 10 – Срез ЧЛО эмбриона основной группы (16 день). Окр. H&E. О. 10. Ок. 10

Проявления отклонений в развитии неба были наиболее заметны в передней его части (рис. 11). В области первичного неба и передней части твердого неба нос был укорочен. Вертикальная часть его хрящевой перегородки отсутствовала. Двусторонние расщелины обнаруживаются в области первичного среднего небного треугольника, а перегородка носа отклоняется в сторону более узкой расщелины. В передней части твердого неба, боковые отростки неба очень малы или имеют неправильную конфигурацию. В задней области у нескольких животных были найдены аномалии в виде щитовидно-язычной щели. Кроме того, уменьшился объем хрящевой носовой капсулы в средней части твердого неба. Само небо выглядит нормальным, начиная с середины твердого неба назад.

У эмбрионов крыс, подвергшихся экспериментальному воздействию с блокированием ацетилхолина на 13 сутки эмбрионального развития, в области первичного неба хрящевая перегородка носа и носовая капсула были хорошо разграничены. Боковые небные отростки в этой области горизонтальны и сращены с носовой перегородкой. Во всех остальных участках неба небные отростки направлены в вертикальном направлении вдоль языка.

Таким образом, дефицит ацетилхолина на ранней постимплантационной стадии (Е9) оказывает повреждающее действие на развитие исследованных отделов и оставляет длительный и, видимо, необратимый след в их структурной организации.

Изменения нервного аппарата ЧЛО при деплеции норадреналина



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 7 |
 




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.