WWW.ДЕНЬСИЛЫ.РФ

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Медицина

 


Pages:     | 1 | 2 ||

Лёгочнойлокализации

-- [ Страница 3 ] --

Этиданные подтверждают концепцию о влиянииснижения экспрессии адгезивныхмолекул наопухолевуюпрогрессию иметастазирование

Экспрессия маркера пролиферирующихклеток Кi67.Пролиферативную активностьопухолевых клеток выявляли с помощьюантитела кКi67, экспрессирующегося в ядрах. В типичных карциноидахуровеньпролиферативнойактивности составил 0-3%, при этом 11% всехопухолей (8 из 73) не экспрессировалиКi67. В атипичных карциноидахпролиферативныйиндекс колебался от 2 до 20%. Следует отметить,что средитипичных карциноидов только в 1 опухоли выявлено более 2% Ki67-позитивныхклеток. Внейроэндокринныхкарциномах индекс пролиферациисоставил 40-65% в крупноклеточныхраках и 70-98% в мелкоклеточныхраках.

Такимобразом, количество Ki67-позитивныхклеток вкарциноидах лёгкого намного ниже, чем в высокозлокачественных НЭО (р0,001). В среднеминдекс Ki67 втипичных карциноидах составил 0,54±0,06%, ватипичных 6,20±0,78%, внейроэндокринныхкарциномах 72,9±2,05%. В большинствеисследованныхкарциноидовнаблюдаласьположительная корреляциямеждупролиферативныминдексом иколичеством митозов.

Пролиферативнаяактивность вкарциноидахповышаетсяпри увеличении стадии заболевания.Ватипичныхкарциноидах выявлено статистическидостоверное нарастаниеиндекса Ki67 как приувеличении размера опухоли, так и при наличии метастазов. При типичномкарциноиде картина несколько иная: болеевысокая пролиферативнаяактивностьсвязана сбольшим размером опухоли, но не сналичием метастазов (табл.3)

Многими исследованиямиподтверждено, что пролиферативнаяактивность является важнымпрогностическимфактором НЭОи большинство классификацийполагаются именно наэтот признак, чтобыразграничить опухоли разнойстепенидифференцировки (Klimstra D. et. al., 2010). Классификацияопухолей лёгких ВОЗосновывается только намитотическом индексе, однако для НЭОжелудочно-кишечноготракта Европейская ассоциацияпо изучениюнейроэндокринныхопухолей (ENETS)предложилаклассификацию с использованиеминдекса Ki67 (Ferrone C. R.et. al., 2007; Rindi G.et. al., 2007). Полученныенами данныепозволяют считать, чтотипичные карциноиды лёгкогосоответствуютградации G1, аатипичныеградации G2 поклассификации ENETS.

Таблица 3

Экспрессия Ki67в карциноидах взависимости от размераопухоли иналичия метастазов

Статусопухоли Индекс Ki67 %, ±m
ТК р АК p
T-статус T1 0,35±0,05 <0,05 3,65±1,67 <0,05
T2 0,90±0,76 7,02±1,21
N-статус N0 0,41±0,06 >0,05 3,85±0,46 <0,05
N1-2 0,51±0,07 9,10±1,73

Экспрессиябелков, регулирующих апоптоз. Для определения ролибелков, регулирующих апоптоз, в опухолевойпрогрессии использовали антитела к Bcl-2 иВах, выполняющих противоположнуюрегуляторную функцию, а также выявлялиэкспрессию мутантного р53.

БелокBcl-2.Экспрессия Bcl-2 возрастает по мереувеличения злокачественности каккарциноидных опухолей, так и НЭО в целом(р0,001). В типичныхкарциноидах уровень экспрессии составил0,17±0,07 баллов, в атипичных 2,09±0,28 баллов, внейроэндокринных карциномах – 4,35±0,14 баллов. При сравненииэкспрессии Bcl-2 в карциноидах на разныхклинических стадиях, статистическизначимых отличий как приналичии\отсутствии метастазов, так и приувеличении размера опухоли невыявлено.

Белок Bах. При сравненииэкспрессии Bах в типичных и атипичныхкарциноидах (экспрессия в баллах составила3,95±0,16 и 3,79±0,26 соответственно), а также наразных клинических стадиях, статистическизначимых отличий не установлено. Внейроэндокринных карциномах экспрессиямаркера составила 2,38±0,16 балла.

Белок р53. Экспрессия р53 в типичныхкарциноидах составила 0,35±0,06 балла, ватипичных –0,93±0,14 балла, что значительно ниже (4,23±0,10балла) показателей ввысокозлокачественных НЭО (р0,001).Статистически значимых различий вхарактере экспрессии р53 от стадиикарциноидной опухоли не выявлено. Однако,среди карциноидов с метастазами и размеромболее 3см количество опухолейэкспрессирующих и не экспрессирующих р53примерно равное, в опухолях без метастазови небольших размеров числор53-отрицательных опухолей было несколькобольше.

Таким образом, мутацияр53 не характерна для карциноидных опухолейлёгких. В низкодифференцированных НЭОэкспрессия р53 выявлялась значительно чаще.Это предполагает, что р53 не играет ведущейроли в патогенезе карциноидов, как этонаблюдается в нейроэндокринныхкарциномах. Следует отметить, чтоэкспрессия р53 несколько чаще выявляется ватипичных карциноидах, нежели втипичных.

Для сравнительнойоценки экспрессии протеинов-регуляторовапоптоза использован коэффициентапоптоза, представляющий собойсоотношение Bсl-2/Вах. В группе типичныхкарциноидов случаев с коэффициентомапоптоза более 1 не выявлено, тогда как ватипичных карциноидах количество такихопухолей составило 1\3 от общего числа.Предполагается, что дикий тип p53 долженинициировать апоптоз путем активированияпроапоптотического гена Bax и супрессииантиапоптотического гена Bcl-2. Такимобразом, опухоли с мутантным р53 в большейстепени подвергаются воздействию Bcl-2,подавляющего апоптоз, чем Вах. Так, ватипичных карциноидах с коэффициентомапоптоза более 1 в большинстве случаев (89%)выявлена экспрессия р53, а при коэффициентеменее 1 –только в половине случаев. При опухолевойпрогрессии отмечены некоторые изменения всоотношении экспрессии Bcl-2\Bax (табл.4).Коэффициент апоптоза возрастает по мереувеличения размера опухоли, однако связи сметастазированием не выявлено.

Такимобразом, баланс про- и антиапоптотических белков семейства Bcl-2 – важная детерминанта,определяющаяпредрасположенностьклетки капоптозу.

Таблица 4

Коэффициент апоптоза в карциноидахв зависимости от размера опухоли и наличияметастазов

Статусопухоли Количествонаблюдений взависимости от коэффициентаапоптоза, n (%)
<1 1 >1 р
Т-статус T1 59 (56) 5 (5) 3 (4) <0,05
T2 26 (25) 5 (5) 6 (6)
N-статус N0 74 (74) 7 (8) 7 (8) >0,05
N1-2 11 (10) 3 (3) 2 (2)




Выявлено, что приувеличениизлокачественности карциноидныхопухолей количествоВс1-2- ир53-позитивныхклеток вних возрастает. Коэффициентапоптоза вкарциноидныхопухолях также повышался по мереснижениядифференцировки. Однако, во всех случаях положительнойэкспрессии р53 и Bcl-2, она носила слабовыраженныйхарактер истатистическидостоверныхданных овлиянии этихбелков наболее агрессивное течениекарциноидныхопухолей не получено. Этирезультатыпредполагают, что отсутствиемутации р53и гиперэкспрессия антиапоптотического белка,низкаяпролиферативнаяактивность – факторы, определяющиеотносительнодоброкачественноетечение карциноидов лёгких. Установлено,что росткарциноидныхопухолей вбольшей степени зависит от уровня пролиферативнойактивности, нежели от нарушений в процессе регуляцииапоптоза. Высокий индекс Ki67имеет большее прогностическоезначение, чем экспрессияотдельныхапоптотическихмаркеров.

Экспрессия рецепторафактора роста CD117(c-kit). Уровень экспрессиис-kit в типичных карциноидах составил в среднем 0,71±0,13 баллов, в атипичных 1,32±0,31балла,в нейроэндокринных карциномах 3,08±0,24балла.Такимобразом,существенной разницы междуэкспрессией CD117 втипичных иатипичныхкарциноидах не выявлено (р>0,05), однако в НЭО высокойстепенизлокачественности наблюдалась значительноболее выраженнаяиммунореактивность клеток с этим маркером (р0,001). Присравнении экспрессии CD117в карциноидных опухолях на разныхклинических стадиях не установленостатистическизначимых отличий.

Экспрессия альфа метилацилкоэнзим Арацемазы (АМАСR).AMACR – митохондриальный ипероксисомный фермент, участвующий вокислении жирных кислот. AMACR играет важнуюроль в опухолевом генезе, однакомолекулярные механизмы этого процессаостаются не изученными. Гиперэкспрессия AMACR выявлена вомногих опухолях, а также в предопухолевыхпроцессах (Noske A.et. al.,2011; Ouyang B. et. al.,2011; Gilani S. M. et. al., 2012; Schaik F. D. et. al.,2012). Экспрессия этогомаркера втипичных карциноидах низка (0,87±0,17 баллов), а ватипичныхкарциноидах уровень экспрессии (2,00±0,31 балла)сходен стаковым внейроэндокринныхкарциномах (1,88±0,26 балла).

Длятипичныхкарциноидов выявлено статистическизначимое различие в характере иммунореактивности опухолевыхклеток сAMACR в зависимостиот наличияметастазов и размера первичногоочага (табл.5).

Таблица 5

Экспрессия АМАСR вкарциноидах в зависимостиот размераопухолии наличияметастазов

Статусопухоли Количествонаблюдений по типамэкспрессии, n
ТК,1-5 баллов ТК, 0 баллов р АК, 1-5 баллов АК, 0 баллов p
T-статус T1 11 43 <0,05 7 6 >0,05
T2 10 9 14 4
N-статус N0 16 51 <0,05 12 9 >0,05
N1-2 5 1 9 1

Ватипичныхкарциноидах такая тенденция не прослеживается,однако интенсивная экспрессияэтого маркерабольшинствомопухолевым клеток обнаруженатолько вслучаях сметастазами (р<0,05). В целом, как в типичных,так ив атипичныхкарциноидахинтенсивная экспрессия(гиперэкспрессия)этого маркера выявленатолько вопухолях сметастазами.

Результаты проведенногокомплексногоклинико-морфологическогоииммуногистохимическогоисследованияпозволили установить, что ряд иммунофенотипических признаков(такие каквысокийиндекс Ki67, коэффициент апоптоза более 1,редукция экспрессии адгезивных молекул игиперэкспрессия AMACR) являются неблагоприятнымипрогностическими критериями,свидетельствующими о высоком рискепрогрессирования опухолевого процесса прикарциноидах лёгкого. Полученныенами данныенеобходимо учитывать наряду с классическиминеблагоприятнымипризнаками при выполненииорганосохраняющихопераций. Кроме того, применениеиммуногистохимическогометода позволяет болеедостоверноопределить степень злокачественностинейроэндокринныхопухолей.Рекомендуемыедифференциально-диагностические маркерыпредставлены в таблице 6.

Таблица 6

Различия виммунофенотипе НЭО лёгких в зависимостиот степенизлокачественности

Тип опухоли Характерэкспрессиииммуногистохимических маркеров
Хром панЦК CD117 Bcl-2 Ki67,% АМ TTF-1 p53
ТК + + -/+сл -/+сл 0-3 + - -\+
АК + + -/+сл +/-сл 2-20 + -\+ -\+
рак -/+сл +\-ПГ +инт +инт 40-98 -/+ +\- +\-

Примечание: Хром –хромогранин А, панЦК – панцитокератинАЕ1\3,АМ – адгезивныемолекулы,ПГ – перинуклеарныегранулы;

«+» экспрессиямаркера в90-100% случаев; «+/-»экспрессия маркера в 50-90% случаев; «-/+»экспрессия вменее чем 50%случаев; «-»отсутствиеэкспрессии;

сл–слабоположительнаяреакция вчасти клетокопухоли; инт–интенсивнаяреакция вбольшинстве клеток.

ВЫВОДЫ

  1. Наиболее информативные маркеры эпителиальнойдифференцировки в карциноидных опухоляхлёгких –панцитокератин АЕ1/3, цитокератин 18 иэпителиальный антиген Ber-Ep4; их экспрессия вбольшинстве опухолевыхклеток выявлена у 91%, 97% и 93%больных соответственно. Реакция сэпителиальным мембранным антигеном (ЕМА)у 76% пациентов былаположительной лишь в отдельных клетках.Экспрессия цитокератинов в виде перинуклеарныхгранул установлена в 14% случаев при использованиицитокератина АЕ1/3 и в 9% при использованиицитокератина 18.
  2. Нейроэндокринныемаркеры синаптофизин ихромогранин А имеютнаиболее высокие показателичувствител

    Pages:     | 1 | 2 ||
     




Похожие работы:







 
2013 www.деньсилы.рф - «МЕДИЦИНА-ЛЕЧЕНИЕ-ОЗДОРОВЛЕНИЕ»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.